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加えて撹拌する際に，ペクチナーゼ（マセラーゼ）0.04gを添加する方法も検討した．ろ過後，ろ液を1880×gで30分遠心し， 遠心上清にACP粒子（積水化成品工業）0.3 gを添加し1 時間撹拌した．遠心で集めたACP粒子を3.3Ｍクエン酸3 mlで溶解し，溶解

https://www.pref.saitama.lg.jp/documents/220361/47_2013_06jigyohoukoku01.pdf種別：pdf サイズ：200.358KB

トリル／1%ギ酸水溶液（4：1）を加え10mLとし，振とう後，30分間超音波処理により分散させた後，遠心分離（10,000rpm，5分間）し，その上清を採り，試料原液とした．試料原液をアセトニトリル／1%ギ酸水溶液（4：1）で適宜希釈して試料溶液とした．定性分析

https://www.pref.saitama.lg.jp/documents/220361/47_2013_07kenkyu03.pdf種別：pdf サイズ：365.61KB

された精製・濃縮方法を使用した．模擬試料での濃縮・精製後SEA及びSEC１の回収率は75.7％，34.5％であった． 検体１では，試料上清液中のSEはmini VIDASで不検出， RPLAは陰性であった．濃縮後でも同様であった．検体２では試料上清液中のSEはmini VIDASでTV値

https://www.pref.saitama.lg.jp/documents/220361/47_2013_kt-09shoukai~zasshi.pdf種別：pdf サイズ：310.911KB

チューブに細切した試料0.2gを採り，0.5vol%ギ酸含有メタノール2.5mLを加えてホモジナイズし，3500rpmで10分間遠心分離し上清を分取した．残渣に水2.5mLを加え，同様の抽出操作を行い， 上清を合わせて50vol%メタノールで5mLに定容したものを抽

https://www.pref.saitama.lg.jp/documents/220464/48_2014_07kenkyu01.pdf種別：pdf サイズ：711.713KB

港型36 株，B型61株），平成27年度は2014/15シーズンに分離した118株（A香港型106株，B型12株）を調査対象とした． MDCK培養上清からRNAを抽出,RT-PCRを行い，ダイレクトシークエンス法によりノイラミニダーゼ（NA）タンパク質をコードする遺伝子領

https://www.pref.saitama.lg.jp/documents/220494/50_2016_07jigyohoukoku02.pdf種別：pdf サイズ：287.439KB

伝子が陰性であることを確認した便に 9倍量の生理食塩水を加え10倍乳剤とし，チューブに2mL ずつ入れ，遠心後，上清を捨て約200mgの便沈渣を作製した．2名の便沈渣それぞれに1菌種につき3段階の濃度の菌液を添加し検体とした．検

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た． 3成分定量については，試料1錠を粉砕し，50％アセトニトリルまたはメタノールを添加して，超音波抽出した．この上清を50％アセトニトリルで適宜希釈して試料溶液とし，高速液体クロマトグラフ（HPLC）で測定した．分析法は，各製品の包装

https://www.pref.saitama.lg.jp/documents/220494/50_2016_07jigyohoukoku04.pdf種別：pdf サイズ：285.075KB

トとしたリアルタイム RT-PCR法で山形系統とビクトリア系統を同定した．なお， 分離株から同定する場合には，培養上清35µlをマイクロチューブに採り，80℃5分加熱後氷上で冷却したものを templateとして用いた． (6) HI試験国立感染症研究所イ

https://www.pref.saitama.lg.jp/documents/220494/50_2016_08kenkyuu01.pdf種別：pdf サイズ：638.631KB

採取し,アセトニトリル及び水（1：1）混液 18 mL及び酢酸1 mLを加えてホモジナイズした．3,500 rpm,5分間遠心分離後，上清を採取した．そのうち2 mL をとり，水2 mLを加えた．この溶液をInertSep PRS（500 mg/6 mL）に負荷した後，水及びメタノール各5 mLで

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出し，その抽出液に，飽和塩化ナトリウム溶液，n-ヘキサン及び2mol/L塩酸を加えて振とう抽出した．遠心分離し，得られた上清を，PSAミニカラムに注入し，アセトンで洗浄後，2vol%酢酸含有アセトン溶出した．溶出液を濃縮乾固後,アセトニトリル－

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